服务简介

用途：通过 CRISPR/Cas9、TALEN、ZFN 等技术，实现基因敲除（KO）、敲入（KI）、点突变或表观调控，用于功能研究、疾病模型构建及基因治疗开发。

服务内容：

1. 靶点设计与工具构建

   • sgRNA设计（CRISPR）或蛋白核酸酶设计（TALEN/ZFN），优化特异性及效率。

   • 载体构建：CRISPR质粒、病毒载体（慢病毒/AAV）或 RNP（核糖核蛋白复合物）递送系统。

2. 细胞/胚胎编辑

   • 适用 细胞系（原代/肿瘤/干细胞） 或 动物胚胎（小鼠、大鼠等）。

   • 转染/感染方式：化学法、电转、显微注射等。

3. 编辑效率验证

   • T7E1/Sanger测序（Indel检测）、NGS（脱靶分析和编辑效率统计）。

   • WB/qPCR（蛋白/mRNA水平验证）。

4. 稳转细胞系构建

   • 单克隆筛选（有限稀释法/FACS）、抗性标记整合及功能验证。

5. 功能与表型分析（可选）

   • 细胞增殖/凋亡/迁移实验，或动物模型表型追踪。

服务流程：

1. 需求确认：提供目标基因信息（序列/NCBI ID）、编辑类型（KO/KI/点突变）及样本类型（细胞/胚胎）。

2. 方案设计：sgRNA设计、载体选择、检测方法确认（3-5个工作日）。

3. 实验执行：

   • 基因编辑→阳性克隆筛选→编辑验证（实验周期：4-8周，视复杂度而定）。

4. 结果交付：测序报告、编辑效率数据、稳转细胞系或动物模型（如适用）。

客户须知

• 样本要求：细胞需提供培养条件及代次信息；胚胎需明确物种及发育阶段。

• 交付标准：编辑效率≥70%（常规细胞），脱靶率≤5%（NGS验证）。

• 定制服务：支持基因大片段插入（≤10 kb）、条件性敲除（Cre-loxP）等复杂需求。