服务简介

用途：用于基因表达分析，通过逆转录（RT）将RNA转换为cDNA，再进行PCR扩增，检测目标基因的表达水平。

服务内容：

1. RNA提取与质检

• 从细胞、组织或血液中提取总RNA。

• 检测RNA纯度（A260/A280）和完整性（RIN值）。

2. 逆转录（RT）

• 使用高特异性逆转录酶合成cDNA（可选oligo(dT)、随机引物或基因特异性引物）。

3. 定量/半定量PCR

• qPCR（实时定量）：SYBR Green或TaqMan探针法，提供Ct值及相对/绝对定量结果。

• 半定量PCR：常规PCR+电泳分析，适用于快速筛查。

4. 数据分析

• 计算基因表达差异（如2−ΔΔCt法），提供标准化内参（如GAPDH、β-actin）。

服务流程：

1. 样本提交：提供新鲜/冻存样本（细胞≥10⁶个，组织≥50mg）或已提取RNA（≥1μg）。

2. 实验执行：

   • RNA提取与质检：1-2个工作日。

   • RT-PCR：2-3个工作日（qPCR）/1个工作日（半定量）。

3. 结果交付：包括原始数据（Ct值、电泳图）、分析报告及结论建议。

客户须知

• 样本要求：RNA样本需无降解（28S/18S条带清晰），A260/A280为1.8-2.0。

• 引物设计：可提供目标基因序列或由我方设计合成。

• 内参选择：默认使用GAPDH，可指定其他内参基因。