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质粒DNA制备

编号:FW0009
品牌:CELL-FREE TECH
产品详情

服务简介

用途:提供高纯度质粒DNA,适用于 基因克隆、细胞转染、体外转录/翻译、测序 等分子生物学实验。



服务内容:


  1. 质粒扩增与提取

    • 大肠杆菌(DH5α、TOP10等)中扩增质粒,支持 低/高拷贝 载体(≤20 kb)。

    • 可选 小量(≤5 μg)、中量(10-50 μg)、大量(≥100 μg) 制备。

  2. 纯化分级

    • 常规纯化(去蛋白/RNA污染,A260/A280=1.8-1.9)。

    • 去内毒素纯化(适用于敏感细胞转染,内毒素≤0.1 EU/μg)。

    • 超纯级(OD260/230≥2.0,适用于长读长测序)。

  3. 质检与验证

    • 浓度检测(Nanodrop/Qubit)、电泳验证(超螺旋占比≥90%)。

    • 可选 限制性酶切Sanger测序 确认质粒完整性。

  4. 附加服务

    • 质粒线性化(酶切)、电转化级质粒制备、定制载体构建。



服务流程:


  1. 提交需求:提供质粒载体信息(抗性、拷贝数)及宿主菌类型(或委托我方转化)。

  2. 实验执行

    • 菌液扩增→质粒提取→纯化分级→质检(常规周期:3-5个工作日)。

  3. 结果交付:质粒DNA(冻干或液体)、质检报告(浓度、纯度、电泳图)。



客户须知

  • 样本要求:若委托我方转化,需提供质粒载体或菌种;宿主菌需明确抗性(如Amp/Kan)。


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